Metodi didattici

Modulo: 4247/1 - BIOCHIMICA CLINICA Lezioni frontali con proiezione di presentazioni in Power Point, articoli scientifici, discussione in aula con gli studenti. Modulo: 7977/1 - PATOLOGIA GENERALE --

Teaching Methods

Modulo: 4247/1 - BIOCHIMICA CLINICA Lectures with projection of Power Point presentations, scientific articles, class discussion with students. Modulo: 7977/1 - PATOLOGIA GENERALE --

Verifiche dell'apprendimento

Modulo: 4247/1 - BIOCHIMICA CLINICA Verifiche in itinere (senza voto); esame orale finale. Modulo: 7977/1 - PATOLOGIA GENERALE --

Assessment

Modulo: 4247/1 - BIOCHIMICA CLINICA Ongoing evaluation/mid-term review (without mark); final oral examination. Modulo: 7977/1 - PATOLOGIA GENERALE --

Programma del Corso

Modulo: 4247/1 - BIOCHIMICA CLINICA - Il Laboratorio diagnostico di Biochimica Clinica: biomarcatori, variabilità analitica e variabilità biologica - Cenni sui metodi quantitativi: analisi colorimetriche e fluorimetriche, ELISA, RIA, HPLC. - Cenni sull’utilizzo dell’emocromo e del protidogramma nella diagnostica di patologie infiammatorie. - La diagnostica molecolare: concetto di marcatore molecolare. - Metodiche di diagnostica molecolare e loro applicazioni: • Isolamento degli acidi nucleici (DNA, RNA) da diverse matrici biologiche; • Elettroforesi e quantificazione spettrofotometrica degli acidi nucleici; • Screening di mutazioni mediante metodi basati su PCR: PCR allele-specifica; sequenziamento diretto del DNA, Real-time PCR, microarray di oligonucleotidi, Next Generation Sequencing (NGS). Test predittivi. • Analisi dell’espressione genica mediante Real-time PCR, microarray a cDNA, RNAseq-based NGS. Diagnostica molecolare precoce. • Proteomica: microarray di proteine, spettrometria di massa Attività pratica di laboratorio (1 CFU) • Procedure pre-analitiche (manipolazione campioni biologici: accettazione, centrifugazione, preparazione e conservazione aliquote di lavoro) • Dosaggio analiti sierici con tecnica ELISA • Dosaggio analiti sierici con tecnica HPLC • Dosaggio proteine sieriche con metodo Bradford • Determinazione di AOPP sierici con metodo colorimetrico • Analisi di polimorfismi genici mediante Real-time PCR Modulo: 7977/1 - PATOLOGIA GENERALE --

Course Syllabus

Modulo: 4247/1 - BIOCHIMICA CLINICA - The Diagnostic Laboratory of Clinical Biochemistry: biomarkers, analytical variability and biological variability - Notes on quantitative methods: colorimetric and fluorimetric analysis, ELISA, RIA, HPLC. - Notes on the use of blood counts and serum proteins electrophoresis in the diagnosis of inflammatory diseases. - Molecular diagnostics: concept of molecular marker. - Molecular diagnostic methods and their applications: • Isolation of nucleic acids (DNA, RNA) from different biological samples; • Electrophoresis and spectrophotometric quantification of nucleic acids; • Screening of mutations by PCR-based methods: allele-specific PCR; direct DNA sequencing, Real-time PCR, oligonucleotide microarrays, Next Generation Sequencing (NGS). Predictive tests. • Analysis of gene expression by Real-time PCR, cDNA microarrays, RNAseq-based NGS. Early molecular diagnostics. • Proteomics: protein microarrays, mass spectrometry Training laboratory activity (1 CFU) • Pre-analytical procedures (biological sample handling: acceptance, centrifugation, preparation and storage of working aliquots) • Quantitative analysis of serum analytes with ELISA technique • Quantitative analysis of serum analytes with HPLC technique • Bradford method for quantitative analysis of proteins • Quantitative analysis of serum AOPP by colorimetric method • Qualitative analysis of gene polymorphisms by Real-time PCR Modulo: 7977/1 - PATOLOGIA GENERALE --