Obiettivi Formativi

Il laboratorio di ecocitossicologia e dei principali indicatori biologici, cioè organismi viventi (animali le cui risposte, individuali e/o all’interno della comunità, sono in grado di dare precise indicazioni sulle caratteristiche generali del fenomeno naturale e/o di origine antropica. Abilità: essere in grado di effettuare specifiche metodologie di analisi ecocitossicologiche e di programmare e di valutare il significato dei risultati ottenuti.

Metodi didattici

Esercitazioni pratiche che vengono svolte in piccoli gruppi in laboratorio.

Prerequisiti

Conoscenze di base di biologia ed ecologia

Verifiche dell'apprendimento

La verifica finale consiste in un esame orale.

Programma del Corso

•Dissezione di un bioindicatore, procedure di conservazione dei vari materiali biologici, fasi della processazione istologica, reazioni istochimiche ed immunoistochimiche utili a mettere in evidenza: -alterazioni istomorfologiche degli organi bersaglio (branchie e intestino); -risposte di molecole che variano in relazione alla presenza di inquinanti ambientali e pertanto posso essere considerati dei validi biomarkers come l’ossido di azoto sintetasi neuronale (nNOS), la serotonina, l’acetilcolina e alcuni neuropeptidi (PACAP, VIP, 5HT, ecc..); -il turnover cellulare, mediante la tecnica TUNEL e la presenza di cellule PCNA-positive; -produzione di sostanze che tendono a citoproteggere, come la iNOS, detossificare, come il citocromo P450 o le metallotioneine. •Tecniche di laboratorio utili ad evidenziare alterazione del DNA (Commet Assey, test dei micronuclei) •Procedure di estrazione di acidi nucleici e di RT-PCR per analizzare l’espressione genica di molecole biomarkers. •Analisi spettrofotometriche attività acetilcolinesterasi cerebrale “AChE” e butirrilcolinesterasi “BChE” nel plasma. •Analisi spettrofluorimetriche attività enzimatica “EROD” e “BPMO” nel fegato e “IPA” nella bile •Le attività di Laboratorio si svolgono nei locali presso i quali svolge la propria attività di ricerca il docente titolare del corso, le strumentazioni e il materiale necessario. Viene offerta attività di supporto e tutorato per gli studenti che ne faranno esplicita richiesta. •La verifica finale consiste in un esame orale sugli argomenti trattati durante il corso.